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遺傳毒性試驗是評估藥物遺傳毒性的常用方法

更新時間:2020-08-23      點擊次數(shù):3150
  遺傳毒性試驗是一種使用哺乳動物或非哺乳動物細(xì)胞,細(xì)菌,酵母或真菌的測試,以確定測試樣品是否引起基因突變,染色體結(jié)構(gòu)畸變以及其他DNA或基因變化。進(jìn)行測試時,應(yīng)在至少兩次測試中使用哺乳動物細(xì)胞來研究不同的測試終點,從而確定醫(yī)療器械(包括口腔器械))生物(口腔)材料和/或其提取物引起遺傳的能力損害和遺傳變化。這是遺傳毒理學(xué)研究的重要內(nèi)容。它可以檢測藥物是否具有誘變,異常和致癌作用,它是檢測基因突變和評估藥物遺傳毒性的常用方法之一。
  遺傳毒性試驗的原理:鼠傷寒沙門氏菌菌株(TA系列)是組氨酸缺陷型突變體,也就是說,它們失去了合成組氨酸的能力,因此無法在無組氨酸的培養(yǎng)基中生長。如果測試物質(zhì)是誘變劑,則可以誘導(dǎo)菌株逆向突變并恢復(fù)合成組氨酸的能力,從而在缺乏組氨酸的堿性培養(yǎng)基中生長。菌落的數(shù)量反映了被測物質(zhì)的致突變性。
  染色體畸變包括染色體的結(jié)構(gòu)和數(shù)值畸變,由外源因素(例如破壞劑)誘導(dǎo)的染色體或染色體斷裂進(jìn)一步導(dǎo)致染色體缺失和重排。常見的類型包括骨折,碎片,缺失,原位,移位等。在體外,在存在或不存在體外代謝活化的情況下,將哺乳動物細(xì)胞暴露于不同濃度的測試物質(zhì)。一定時間后,用秋水仙堿處理細(xì)胞,使更多的有絲分裂細(xì)胞終止于中期。收集細(xì)胞進(jìn)行吉姆薩染色,以觀察染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)目畸變。應(yīng)建立至少3個測試劑量,溶劑對照組和陽性對照組。
  遺傳毒性試驗是檢測破損劑或有絲分裂毒物的有效方法。在細(xì)胞有絲分裂過程中,由于紡錘體功能障礙而形成的染色體結(jié)構(gòu)破壞或染色體滯后導(dǎo)致的染色體片段由于紡錘體牽引力的損失而全部保留在細(xì)胞質(zhì)中,形成了與核染色一致的染色體,稱為微核。嚙齒類動物的骨髓中多色紅細(xì)胞(PCE)的微核試驗是常用的。用測試物質(zhì)處理嚙齒動物,然后殺死。取出骨髓,切片,固定并染色。在顯微鏡下計數(shù)PCE中的微核。體內(nèi)實驗可以更模擬體內(nèi)測試物質(zhì)的轉(zhuǎn)化過程。因此,體內(nèi)微核試驗常被用作國內(nèi)外藥物,食品和化學(xué)藥品遺傳毒性評價的實驗組合之一。
 
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